Давыдова Е.Е., Тишков В.И.

Клонирование гена оксидазы D-аминокислот из дрожжей Trigonopsis variabilis

Оксидаза D-аминокислот (DAAO) является одним из двух ферментов, используемых при ферментативном получении из цефалоспорина С 7-аминоцефалоспорановой кислоты – исходного соединения для синтеза b-лактамных антибиотиков нового поколения. Для создания высокоэффективного биокатализатора окисления цефалоспорина С, ген оксидазы D-аминокислот из дрожжей Trigonopsis variabilis (daao) был клонирован в клетках Е. coli. Методика клонирования включала выделение суммарной мРНК, получение кДНК со специфического праймера и амплификацию гена с помощью ПЦР со специфическими праймерами. Продукт ПЦР был клонирован в векторной плазмиде Е. coli под контролем промотора фага Т7 . Показана экспрессия гена daao в клетках рекомбинантного штамма E. coli.

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2002, том 43, № 6, стр. 353-355